達學堂·答疑討論
Q：我們常遇到前哨淋巴結，但是總是切不全，輪廓是有的，該怎么處理呢？
答：那就是前哨淋巴結周圍有脂肪要去掉，里面有脂肪，脂化了，這個時候切不全，用毛筆拉代替防卷板，切下的片子再用兩根毛筆慢慢拉展，脂肪多了也沒有啥好辦法，為了凍脂肪，凍得過了，脂肪還是沒切下，脂肪中的淋巴結脆的切不了，不好弄。
Q：請問冰凍中單純鈣化組織的合適溫度是多少，如何能切完整呢？
答：這個沒有什么，我們一般是正常溫度，-20°C左右就可以，我一般調至-22°C。
Q：脂肪染色那張幻燈沒有固定?
答：脂肪染色不用專門固定，經高濃度酒精固定可能會丟失部分脂質； 染色前用60%的酒精處理片子也起固定作用。
Q：在冷凍切片的時候你認為那幾個溫度比需要精確控溫？多久上升或者下降一度是可以接受的？
答：一般情況下，如果組織在-16°C以下，大部分組織是可以切出片子的，但是用載玻片粘的時候粘不上，一貼上去很快就要融化一樣，所以對于很多組織，-16°C我們可以切，但是要貼附在玻片上，一般要在-18°C以下，這個時候冷凍的玻片比較完善，去貼的話基本也可以貼上。我認為-16°C是一個點， -18度到-25度基本就可以滿足臨床各種組織切片（脂肪除外）。
Q：AF液的甲醛是百分之40的甲醛吧？
答：甲醛是氣體溶于水，就是甲醛溶液，40%的甲醛溶液就叫福爾馬林，稀釋10倍就是10%的福爾馬林，就是我們組織學固定液濃度；我們一般買的商品化甲醛溶液，這就是40%的甲醛，也就是福爾馬林，我們配AF液就是95%酒精90ml再加10ml的甲醛溶液。
Q：冰凍固定液我們只用95的酒精，沒加甲醛，靳老師認為會存在哪些問題？
答：首先，95酒精也沒啥問題，也是良好的固定劑，是可以固定細胞學和冰凍切片的； 第二，酒精和甲醛固定最大區別呢，是甲醛固定形成了膠狀晶體結構，可以把細胞核、細胞漿里面的好多成分像網一樣包起來，讓它不容易丟失，酒精固定的話如細胞核蛋白成分可能會丟失、核酸凝聚（細胞核染色不好），有的組織成分收縮比較厲害，比如說甲狀腺膠質，用95%酒精固定它就容易掉。
Q：請老師說下晾干固定，怎么操作呢？
答：冰凍切片必須立即固定（不能晾干）這是總的基本要求。但在實際工作中有時碰到細胞核空泡、細胞漿空洞樣改變時，把切好的片子拿來在空氣中揮動幾下，再固定，上述情況會改善，這也是沒有辦法的辦法，不能常用。
