達學堂·答疑討論
Q：反藍液求推薦。
答：我們一般用0.2%的氨水，也可以用飽和碳酸鋰的液體。
Q：冷凍組織時，樣本托是否一定要先預冷凍好？有的老師把樣本托放冷凍切片機在，取材放好組織后，才放到速凍臺上冷凍，切片也沒有明顯冰晶問題。卡頭是否一定要制冷，卡頭制冷在使用中有多大實際作用？
答： 理論上講冷凍托預先冷凍更好，但實際工作中這種操作性不佳，如果手套上有水，一碰冷的樣本托就粘住了，組織放上去后如果想再把組織切面調整一下也比較困難，OCT包埋劑先擠上去的和把組織放好后擠上去的冷凍時偶爾也會裂開，切片時碰到硬的組織有時也容易磕掉下來。我沒有采用預冷凍，冰的導熱速度是水的4倍，我用蘸水的濾紙放在樣本托上取好組織后再取冷凍，速度也快得很，沒有啥影響。樣本夾頭的制冷一般不用開，機箱溫度就可以。
Q：伊紅用水溶性的好還是醇溶伊紅好？
答：理論上講水溶性伊紅染出來立體感更強，三種顏色對比更好，還不容易脫色，在放置過程中顏色可能會加深。但是現在我覺得水溶性伊紅的質量不太好， 溶解效果差，特別一加酸，經常產生沉淀。所以 最早我們把醇溶性伊紅用高濃度的鹽酸讓它沉淀，把鈉離子去掉置換出醇溶性伊紅。我個人個人比較喜歡用醇溶性伊紅。
Q：冰凍切片機切感染標本后怎樣消毒？
答：首先盡量不要接收這些標本，讓臨床填預約單時注明傳染病感染信息。如果已經接受并切片了， 新鮮標本是存在感染風險的， 開紫外線燈40分鐘表面消毒，或用專用甲醇過氧化氫（櫻花有專配）噴涂、75%酒精擦拭；甲醛蒸汽不好操作，可作為徹底消毒時使用。
Q：靳老師那里用的冰凍固定液是什么？
答： 95%酒精90ml再加10ml的甲醛溶液（濃甲醛溶液，市售的含40%甲醛）。
Q：速凍臺一般用起意義大不大，還是只用機動就可以了呢？
答：每個冰凍機都配有冷凍臺，冷凍臺的溫度比機箱溫度低，半導體冷凍速率也快，如果啟動快速制冷（一鍵啟動），冷凍臺在1分鐘內可降到大約-60度左右。但經常啟動的話，半導體部件容易壞，一般我們把組織放到冷凍臺后冷凍就可以。如遇到脂肪多的可以一鍵啟動快速冷凍。
Q：冰晶問題是不是可以先固定再冷凍就可以解決了？而且細胞收縮更復合石蠟切片的細胞形態，不容易誤差。其實原來病理科冰凍切片都是先固定再冷凍切片的，80年代后期開始有恒溫冷凍切片機后才改過來的。
答：冷凍的組織不要固定， 直接冷凍；先固定要不就凍不住（酒精固定后，酒精的玻璃態溫度很低）、要不就是大冰晶（甲醛固定）。過去甲醛固定過的組織一般要經蔗糖、明膠置換出水分后再冷凍才能改善效果。
