達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q:制作冰凍切片中怎么盡量的減少冰晶?有什么操作細(xì)節(jié)需要注意的?
答:取材及時(shí)、速凍。不要反復(fù)凍融。
Q:我們明天有個(gè)淋巴結(jié)的冰凍,有什么注意要點(diǎn)嗎,還有包埋的時(shí)候除了底膠,放置標(biāo)本后還需要打膠嗎?
答:放置標(biāo)本后可以打膠,可以組織兩端打膠、也可以周圍打膠,主要是切得時(shí)候完整、平展。也可以不打膠,我一般不打膠,要看你的技術(shù)了。淋巴結(jié)容易發(fā)脆,冷凍適度就趕緊切,不要反復(fù)凍融式復(fù)溫。
Q:怎么防止速凍過(guò)度?怎么處理速凍過(guò)度?
答:大部分組織不存在這個(gè)問題,我們工作中時(shí)間比較緊,凍好就切了。有時(shí)是組織原因,如甲狀腺、淋巴結(jié)容易發(fā)脆(一般認(rèn)為是凍過(guò)了,到脆點(diǎn)了),可以適度復(fù)溫再切。
Q:切冰凍如何避免褶皺??jī)蓮埍鶅銎樱瑫r(shí)染色,一張清晰,一樣模糊不清,什么原因呢?
答:組織冷凍適度,刀角度合適,切片技術(shù)要慢慢提高,學(xué)會(huì)用防卷板。染色與片子厚薄有關(guān)系,越薄的片子要染色時(shí)間越長(zhǎng)。固定要及時(shí)。
Q:靳老師,您單位冰凍箱工作時(shí)的箱體溫度設(shè)置在多少度?
答:-22度。
Q:冰凍組織已經(jīng)形成冰晶之后的,是否有辦法改善切片呢?
答:凍得慢,形成較大、多的冰晶對(duì)切片影響不大,主要影響染色和微細(xì)結(jié)構(gòu)。
Q:97%的甲醇+3%的冰醋酸的固定液效果怎么樣?
答:沒試過(guò),還是按常規(guī)的95%酒精來(lái)配,除了糖原外,一般不用高于95%酒精配固定液。