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達學堂·答疑討論

Q:反藍液求推薦。

答:我們一般用0.2%的氨水,也可以用飽和碳酸鋰的液體。

Q:冷凍組織時,樣本托是否一定要先預冷凍好?有的老師把樣本托放冷凍切片機在,取材放好組織后,才放到速凍臺上冷凍,切片也沒有明顯冰晶問題??^是否一定要制冷,卡頭制冷在使用中有多大實際作用?

答: 理論上講冷凍托預先冷凍更好,但實際工作中這種操作性不佳,如果手套上有水,一碰冷的樣本托就粘住了,組織放上去后如果想再把組織切面調整一下也比較困難,OCT包埋劑先擠上去的和把組織放好后擠上去的冷凍時偶爾也會裂開,切片時碰到硬的組織有時也容易磕掉下來。我沒有采用預冷凍,冰的導熱速度是水的4倍,我用蘸水的濾紙放在樣本托上取好組織后再取冷凍,速度也快得很,沒有啥影響。樣本夾頭的制冷一般不用開,機箱溫度就可以。

Q:伊紅用水溶性的好還是醇溶伊紅好?

答:理論上講水溶性伊紅染出來立體感更強,三種顏色對比更好,還不容易脫色,在放置過程中顏色可能會加深。但是現(xiàn)在我覺得水溶性伊紅的質量不太好, 溶解效果差,特別一加酸,經(jīng)常產生沉淀。所以 最早我們把醇溶性伊紅用高濃度的鹽酸讓它沉淀,把鈉離子去掉置換出醇溶性伊紅。我個人個人比較喜歡用醇溶性伊紅。

Q:冰凍切片機切感染標本后怎樣消毒?

答:首先盡量不要接收這些標本,讓臨床填預約單時注明傳染病感染信息。如果已經(jīng)接受并切片了, 新鮮標本是存在感染風險的, 開紫外線燈40分鐘表面消毒,或用專用甲醇過氧化氫(櫻花有專配)噴涂、75%酒精擦拭;甲醛蒸汽不好操作,可作為徹底消毒時使用。

Q:靳老師那里用的冰凍固定液是什么?

答: 95%酒精90ml再加10ml的甲醛溶液(濃甲醛溶液,市售的含40%甲醛)。

Q:速凍臺一般用起意義大不大,還是只用機動就可以了呢?

答:每個冰凍機都配有冷凍臺,冷凍臺的溫度比機箱溫度低,半導體冷凍速率也快,如果啟動快速制冷(一鍵啟動),冷凍臺在1分鐘內可降到大約-60度左右。但經(jīng)常啟動的話,半導體部件容易壞,一般我們把組織放到冷凍臺后冷凍就可以。如遇到脂肪多的可以一鍵啟動快速冷凍。

Q:冰晶問題是不是可以先固定再冷凍就可以解決了?而且細胞收縮更復合石蠟切片的細胞形態(tài),不容易誤差。其實原來病理科冰凍切片都是先固定再冷凍切片的,80年代后期開始有恒溫冷凍切片機后才改過來的。

答:冷凍的組織不要固定, 直接冷凍;先固定要不就凍不?。ň凭潭ê?,酒精的玻璃態(tài)溫度很低)、要不就是大冰晶(甲醛固定)。過去甲醛固定過的組織一般要經(jīng)蔗糖、明膠置換出水分后再冷凍才能改善效果。
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