達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q:我們常遇到前哨淋巴結(jié),但是總是切不全,輪廓是有的,該怎么處理呢?
答:那就是前哨淋巴結(jié)周圍有脂肪要去掉,里面有脂肪,脂化了,這個(gè)時(shí)候切不全,用毛筆拉代替防卷板,切下的片子再用兩根毛筆慢慢拉展,脂肪多了也沒有啥好辦法,為了凍脂肪,凍得過了,脂肪還是沒切下,脂肪中的淋巴結(jié)脆的切不了,不好弄。
Q:請(qǐng)問冰凍中單純鈣化組織的合適溫度是多少,如何能切完整呢?
答:這個(gè)沒有什么,我們一般是正常溫度,-20°C左右就可以,我一般調(diào)至-22°C。
Q:脂肪染色那張幻燈沒有固定?
答:脂肪染色不用專門固定,經(jīng)高濃度酒精固定可能會(huì)丟失部分脂質(zhì); 染色前用60%的酒精處理片子也起固定作用。
Q:在冷凍切片的時(shí)候你認(rèn)為那幾個(gè)溫度比需要精確控溫?多久上升或者下降一度是可以接受的?
答:一般情況下,如果組織在-16°C以下,大部分組織是可以切出片子的,但是用載玻片粘的時(shí)候粘不上,一貼上去很快就要融化一樣,所以對(duì)于很多組織,-16°C我們可以切,但是要貼附在玻片上,一般要在-18°C以下,這個(gè)時(shí)候冷凍的玻片比較完善,去貼的話基本也可以貼上。我認(rèn)為-16°C是一個(gè)點(diǎn), -18度到-25度基本就可以滿足臨床各種組織切片(脂肪除外)。
Q:AF液的甲醛是百分之40的甲醛吧?
答:甲醛是氣體溶于水,就是甲醛溶液,40%的甲醛溶液就叫福爾馬林,稀釋10倍就是10%的福爾馬林,就是我們組織學(xué)固定液濃度;我們一般買的商品化甲醛溶液,這就是40%的甲醛,也就是福爾馬林,我們配AF液就是95%酒精90ml再加10ml的甲醛溶液。
Q:冰凍固定液我們只用95的酒精,沒加甲醛,靳老師認(rèn)為會(huì)存在哪些問題?
答:首先,95酒精也沒啥問題,也是良好的固定劑,是可以固定細(xì)胞學(xué)和冰凍切片的; 第二,酒精和甲醛固定最大區(qū)別呢,是甲醛固定形成了膠狀晶體結(jié)構(gòu),可以把細(xì)胞核、細(xì)胞漿里面的好多成分像網(wǎng)一樣包起來,讓它不容易丟失,酒精固定的話如細(xì)胞核蛋白成分可能會(huì)丟失、核酸凝聚(細(xì)胞核染色不好),有的組織成分收縮比較厲害,比如說甲狀腺膠質(zhì),用95%酒精固定它就容易掉。
Q:請(qǐng)老師說下晾干固定,怎么操作呢?
答:冰凍切片必須立即固定(不能晾干)這是總的基本要求。但在實(shí)際工作中有時(shí)碰到細(xì)胞核空泡、細(xì)胞漿空洞樣改變時(shí),把切好的片子拿來在空氣中揮動(dòng)幾下,再固定,上述情況會(huì)改善,這也是沒有辦法的辦法,不能常用。