達學堂·答疑討論
Q：蘇木素可以和組蛋白以及核膜成分結合嗎？
答：染色的原理比較復雜，不是絕對、簡單的，是動態的，復雜的。簡單講，組蛋白帶正電荷，和蘇木素結合力弱，與伊紅結合力強，所以不染蘇木素、或蘇木素染色不行時，核就染成紅色了。
Q：靳老師課件中蘇木素和伊紅這個配液可以用做石蠟切片染色液嗎？
答：可以。
Q：想請問下冰凍結束后組織是常溫下解凍再固定嗎？凍膠需要沖洗干凈后才能放固定液嗎？
答：常溫表面解凍就可以放到固定液。OCT包埋劑可以不用沖，如果冰凍頭多、膠也多，就沖一下。
Q：老師一開始說的切片不能晾干再固定會形成空洞，后面怎么又有說晾干再固定可以減少空洞呢？
答：冰凍切片基本原則：及時濕固定。我就怕大家對我后面講的特殊情況處理會誤解。
Q：組織未冷凍時是粘流態嗎？
答：粘流態物質會在外力作用下發生不可逆形變，壓一下一般不會恢復原狀，且要處于流動溫度之上。生物大分子/組織細胞有更為復雜的結構，一般室溫是處于高彈態的。
Q：腎穿冰凍又為什么推薦吹干染色，而不是固定后染色？
答：腎穿刺免疫熒光都是做的如Ig、C3補體類小分子，都是用熒光做，和我們做的普通抗原有區別，我過去做的時候，都是晾干后直接用PBS洗，不固定，一步法效果也不錯。晾干過程是冰晶升華為氣態、大分子失水化膜過程（發生和酒精固定相似的作用），可能這種情況更利于暴漏深埋于多糖基質中的小分子抗原物質。
Q：乳腺組織脂肪較多時，冰凍最佳溫度及時間是多少呢？
答：冷凍是降溫速率比最低溫度更重要，當然溫度低了降溫速率也會更快。新的機子同樣的溫度凍得組織好切就是這個意思。乳腺建議-25度凍，及時用冷錘，修面不要太深。
