達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q：脫水程序完成后，蠟浸泡在脫水機(jī)里，組織在蠟缸里一兩個(gè)小時(shí)會(huì)有影響嗎？
答：沒有影響，哪怕浸過夜也沒有影響。為了使組織對(duì)基因重排沒有影響，我們 一般周五取材，周五晚上脫水，周六早晨就把組織浸在蠟里面，一直到下周一再 來包埋，是沒有問題的。
Q：胃腸大標(biāo)本切片時(shí)，為什么肌肉層更容易出現(xiàn)空洞？
答：在切的時(shí)候，每一層的硬度是不一樣的，當(dāng)蠟浸得越充分的時(shí)候，切片的時(shí)候黏性大，切片的時(shí)候不太容易出現(xiàn)空洞。空洞怎么來的？空洞就是在修片的時(shí)候，蠟的黏度性下降，組織整塊掉下來了，所以容易出現(xiàn)空洞，這個(gè)時(shí)候多細(xì)修一下，空洞很快就沒有了。
Q：福爾馬林色素如何處理掉？
答：堿性酒精。80%酒精100ml加1%氫氧化鉀1ml，把片子泡在堿性酒精里面，就可以把色素去掉。其實(shí)很少 能看到福爾馬林色素。
Q：夏天的時(shí)候切片容易產(chǎn)生一層水霧是怎么回事？
答：有的時(shí)候潮濕，脫水不是很好的情況下，組織里的水很容易進(jìn)去。
Q：并不是每塊組織都需要脫脂，無水酒精加二甲苯會(huì)影響脫水效果嗎？
答：不會(huì)的。脫水時(shí)間夠的情況下，二甲苯對(duì)組織沒有任何影響。
擴(kuò)展
? 二甲苯時(shí)間長了，組織會(huì)發(fā)硬發(fā)脆，這個(gè)理論是錯(cuò)誤的。
我試過在二甲苯下面透明過夜，組織非常好切，根本就不會(huì)出現(xiàn)發(fā)硬發(fā)脆。我也曾經(jīng)試過二甲苯在 62 度的溫度下過夜，也沒有發(fā)現(xiàn)發(fā)硬發(fā)脆。
? 二甲苯是在什么情況下會(huì)造成組織發(fā)硬發(fā)脆 ？
其實(shí)二甲苯只有在浸蠟過程中才會(huì)造成組織發(fā)硬發(fā)脆，即：組織發(fā)硬發(fā)脆都是在浸蠟過 程中引起的。原因如下：
（1）二甲苯有一個(gè)特點(diǎn)：當(dāng)溫度升高的時(shí)候，它可使水析出。如同南方在潮濕的時(shí)候，染完的片子從酒精里出來，倒了二甲苯馬上發(fā)渾，這個(gè)渾說明很多水進(jìn)去了。這時(shí)只需把二甲苯放到溫箱里面半小時(shí)，水就沉在了二甲苯的底部，二甲苯就會(huì)變清，高溫會(huì)使二甲苯的水析出來。
（2）當(dāng)溫度升高的時(shí)候，二甲苯可使水析出，同時(shí)如果組織脫水不徹底，則在浸蠟的過程中，二甲苯就會(huì)把水析出來。由于水和蠟不相溶，在水析出來的過程中，水把石蠟擋在了組織的外面。而蠟的特點(diǎn)是蠟會(huì)緊緊地把這個(gè)組織包住，組織內(nèi)溫度迅速升高，導(dǎo)致組織里面沒有蠟的情況下，組織干烤，就會(huì)發(fā)硬。所以組織發(fā)硬就是在脫水不充分的情況下產(chǎn)生的因此，當(dāng)切片不好切時(shí)，我們一定要考慮浸蠟的因素，會(huì)不會(huì)蠟里的二甲苯帶過去太多了。
Q：當(dāng)天下午3點(diǎn)取材，送來的標(biāo)本也接著取，基本上沒做大標(biāo)本剖開固定，類似情況免疫組化是否可靠？
答：免疫組化固定不好的話，結(jié)果是有問題的。我做過好像有些抗原會(huì)丟失，有些抗原也有增強(qiáng)的現(xiàn)象，似乎對(duì)免疫組化會(huì)有影響，所以還是要固定充分的。
Q：如果選擇環(huán)保固定液，對(duì)后期免疫組化分子會(huì)不會(huì)有影響?
答：環(huán)保固定液用的是用醇性固定液會(huì)有略微影響，但是對(duì)分子不會(huì)有影響。
